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如何搭配流式抗體熒光標(biāo)記點(diǎn)擊次數(shù)：1326 更新時(shí)間：2014-10-23
流式抗體熒光標(biāo)記搭配主要由3個(gè)因素決定的：流式細(xì)胞儀能檢測(cè)多少個(gè)通道、需要同時(shí)檢測(cè)檢測(cè)多少個(gè)指標(biāo)、廠家的抗體有多少種熒光標(biāo)記。如果流式細(xì)胞儀的通道越多，那么同一份樣本能同時(shí)做的表面/胞內(nèi)標(biāo)志就越多.
A、 如何根據(jù)流式細(xì)胞儀搭配流式抗體
流式細(xì)胞儀能檢測(cè)多少個(gè)通道是由有多少根激光決定的以及每根激光的功能決定的，所以首先需要注意兩點(diǎn)：
流式細(xì)胞儀有哪些激光。
不同型號(hào)的流式細(xì)胞儀的同樣的一個(gè)通道檢測(cè)熒光素的能力是不一樣的.
B、搭配熒光素原則
搭配流式熒光素有2個(gè)原則：每個(gè)通道只能選擇1種熒光素；各個(gè)通道之間的熒光素可以隨意搭配，但需注意的是，APC和PE-Cy5一起使用的話，上流式以后，容易導(dǎo)致補(bǔ)償過(guò)度。
C、如果檢測(cè)的指標(biāo)數(shù)目超過(guò)了流式細(xì)胞儀的通道，怎么辦？
如果需要做5個(gè)指標(biāo)，而流式細(xì)胞儀只能做4個(gè)通道，首先將指標(biāo)歸成2類，再將樣本分成2份，分別檢測(cè)。比如需要同時(shí)檢測(cè)CD3、CD4、CD8、IL-4和IFN-gamma，那么將樣本分成兩份，第1份加CD3、CD4、CD8和IL-4，而第2份加CD3、CD4、CD8和IFN-gamma。
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