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流式抗體的知識(shí)要點(diǎn)，一看便知！點(diǎn)擊次數(shù)：2492 更新時(shí)間：2020-04-28
流式抗體能夠在短時(shí)間內(nèi)檢測(cè)分析或分選大量細(xì)胞，在血液學(xué)、免疫學(xué)、腫瘤學(xué)、藥物學(xué)等領(lǐng)域中的應(yīng)用越來(lái)越廣泛。其純度、批次穩(wěn)定性、特異性，以及流式結(jié)果的可重復(fù)性備受重視。
流式抗體的基本結(jié)構(gòu)：
一個(gè)抗體分子上的兩個(gè)抗原結(jié)合部位是相同的，位于兩臂末端稱抗原結(jié)合片段（antigen-binding fragment, Fab）。"Y"的柄部稱結(jié)晶片段（crystalline fragment,Fc），糖結(jié)合在FC 上。Fab是抗原結(jié)合片段，直接結(jié)合抗原。直接效應(yīng)。Fc是結(jié)晶片段，間接效應(yīng)端。
抗體與細(xì)胞的結(jié)合過(guò)程中一般會(huì)出現(xiàn)以下情況：
在抗體孵育過(guò)程中，只有抗體的Fab端與目標(biāo)抗原結(jié)合（特異性結(jié)合）時(shí)，這樣的流式圖才能反應(yīng)出細(xì)胞抗原表達(dá)的真實(shí)情況。
但是，在分子間各種作用力的推動(dòng)下，抗體FC端也經(jīng)常與細(xì)胞表面的FC受體結(jié)合，即我們常說(shuō)的非特異性結(jié)合，此時(shí)流式結(jié)果就往往不能反映真正的抗原表達(dá)情況。
那么，我們?cè)趯?shí)驗(yàn)中如何避免這種非特異性情況的出現(xiàn)呢？
FC受體封閉：
加入FC受體封閉劑，對(duì)細(xì)胞膜表面的FC受體提前進(jìn)行人工封閉干預(yù)；或做CD16/CD32抗體封閉實(shí)驗(yàn)；
同型對(duì)照（Isotype）抗體；
重組基因工程改造抗體（REAfinity? Recombinant Antibodies）。
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